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猪流行性腹泻
本病的流行病学、临床症状、病理变化基本上与猪传染性胃肠炎相似,只是病死率比猪传染性 胃肠炎稍低,在猪群中传播速度也比较缓慢一些,因此床综合诊断方法确诊是比较困难的,主要依 靠血清学诊断。常用诊断方法有免疫电镜、免疫 乳,荧光、间接血凝试验、ELISA,RT-PCR、中和试 验等,其中免疫荧光和ELISA是较常用的。诊断方 面,林志雄等建立了PED微量血清中和试验,采用 适应于传代细胞生长的PEDVG1株,以PK15作指示 细胞48h判定,研究证实本方法检验正确可靠,具有较高的敏感性,可用于流行病学调查和进出境检疫。

(一)酶联免疫吸附试验( ELISA)

ELISA最大的优点是可从粪便中直接检查到PEDV抗原,目前应用也较为广泛。朱维正等应用双 抗体ELISA法从腹泻病猪粪便中直接检测到PED病毒 抗原,当病猪一出现腹泻,即可采粪便检查,即使痊愈不久的病猪,仍可用本法检出。其与电镜检查 的阳性符合率为97.37%,阴性符合率为100%。

(二)免疫荧光(immunofluorescence,IF)

直接免疫荧光法( FAT)检测PEDV是可靠的特异性诊断方法,目前应用最为广泛。崔现兰等应用FAT检查病猪小肠的冷冻切片或小肠抹片,对PEDV人工感染仔猪的检出率为91.4%,对自然腹泻猪的检出率为47.8%。应用间接免疫荧光法(UFAT)对PED阳性猪血清的检出阳性率为89%,PED血清于一20cC冻存10个月,未见效价下降。

本法具有特异性,范围广泛。方法是取病猪小肠作冰冻切片或小肠黏膜抹片,风干后丙酮固定,加荧光抗体染色,充分水洗,封盖镜检,1 - 2h即可做出诊断。

(三)人工感染试验

选用2-3日龄不喂初乳的仔猪,喂以消毒牛 乳,将病猪小肠组织及肠内容物做成悬液,每毫升加青霉素2 000IU和链霉素2 000μg,在室温放置lh, 再接种实验仔猪,如果实验猪发病,再取小肠组织做免疫荧光检查。

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